結(jié)合了抗體的磁珠或樹(shù)脂（Beads）與樣本裂解液孵育，通過(guò)”抗原-抗體“之間的免疫作用，誘餌蛋白被吸附在Beads上，與此同時(shí)，誘餌蛋白的互作蛋白，也一起“共沉淀”到Beads上。洗滌去掉未結(jié)合的蛋白后，再用洗脫緩沖液將互作蛋白復(fù)合物從Beads上洗脫下來(lái)，得到免疫共沉淀（Co-IP）產(chǎn)物。Co-IP產(chǎn)物既可以用Western Blot檢測(cè)已知蛋白，也可以用質(zhì)譜鑒定未知蛋白。
當(dāng)沒(méi)有合適的誘餌蛋白抗體時(shí)，還可以通過(guò)表達(dá)融合了Flag標(biāo)簽的誘餌蛋白，利用Flag標(biāo)簽抗體做免疫沉淀。即樣本過(guò)表達(dá)Flag-Bait，經(jīng)裂解后與anti-Flag珠子孵育，誘餌融合蛋白與Beads結(jié)合，其互作蛋白“共沉淀”到Beads上，再經(jīng)洗滌、洗脫后，用WB或質(zhì)譜檢測(cè)。
服務(wù)內(nèi)容